RNA相關(guān)實驗,需要控制核酸酶污染。DNA污染很難清除。即使只有一個污染的DNA分子被檢測到,也會使整個PCR檢測過程出現(xiàn)誤差。為確保PCR試驗數(shù)據(jù)準(zhǔn)確,預(yù)防DNA或RNA交叉污染,PCR實驗室大多會常備DNA/RNA污染清除劑。德國Minerva Biolabs核酸污染祛除試劑——PCR Clean。
許多不同的真核蛋白靶向兩個或多個亞細胞目的地具有雙重定位的蛋白質(zhì)包括代謝酶、信號因子和凋亡調(diào)節(jié)因子。蛋白靶向平衡的改變影響重要的生理結(jié)果。雙重靶向通常通過翻譯后機制調(diào)節(jié),這種機制有利于兩個或多個競爭性靶向信號中的一個的作用,或促進將多肽保留在特定區(qū)室中的過程或相互作用。
NET1是一種激活RhoA GTPase的鳥嘌呤核苷酸交換因子(GEF),分布于細胞核和細胞質(zhì)中。細胞質(zhì)NET1調(diào)節(jié)RhoA并控制細胞骨架和細胞遷移,而細胞核NET1被認(rèn)為控制細胞對DNA損傷的反應(yīng)。翻譯后修飾可以改變NET1的分布和功能。
然而,有趣的是,NET1基因表達在mRNA定位水平上表現(xiàn)出額外的調(diào)控水平。NET1 mRNA明顯靶向遷移細胞的外周突起細胞質(zhì)區(qū)域。盡管現(xiàn)在已經(jīng)描述了大部分哺乳動物mrna在細胞質(zhì)中的區(qū)隔分布,但這種普遍調(diào)節(jié)模式的確切功能后果尚不清楚。在體內(nèi)腫瘤中觀察到外周NET1 mRNA的定位,這對癌細胞的侵襲很重要然而,外周mRNA的定位和翻譯如何影響NET1蛋白的功能尚不清楚。
相關(guān)研究發(fā)表在《Molecular Cell》上,文章標(biāo)題為:“mRNA location and translation rate determine protein targeting to dual destinations"。
NET1 mRNA的位置及其翻譯速率可以影響競爭結(jié)構(gòu)域確定新合成蛋白靶向的能力,從而有利于與特定伙伴結(jié)合。這種基于RNA的伴侶選擇機制提供了一種控制蛋白質(zhì)功能的強大手段。