通常,如果懷疑細(xì)胞有支原體污染,可直接取細(xì)胞上清進(jìn)行支原體PCR檢測(cè)。因?yàn)榇嬖谥гw污染的細(xì)胞上清中,支原體密度為通常為106-108個(gè)/ml,已足以用于PCR檢測(cè)。本文締一生物/締一生物為您分析Minerva公司的支原體DNA提取試劑盒。
Minverva公司生產(chǎn)的支原體PCR試劑盒靈敏度高,特異性好,檢測(cè)的支原體種類多,很受用戶的歡迎。但有時(shí),支原體檢測(cè)前,還需對(duì)樣品中的支原體DNA進(jìn)行提取。那么,什么時(shí)候需要提取呢?
有如下幾種情況。如細(xì)胞培養(yǎng)液中存在抑制PCR的物質(zhì),這時(shí)就需要提取。細(xì)胞培養(yǎng)基中的血清濃度如果超過12%,那么對(duì)下游的PCR反應(yīng)會(huì)產(chǎn)生抑制。酚紅,對(duì)熒光定量PCR的檢測(cè)也會(huì)干擾。這些均可以通過使用Miverva公司的支原體DNA提取試劑盒來克服。對(duì)于樣品類型是細(xì)胞團(tuán)、疫苗、凍存細(xì)胞和石蠟包埋的組織,也需要提前提取DNA。另外,如果樣品中蛋白含量高于10mg/ml,則先需要用蛋白酶K進(jìn)行處理。
Minerva公司生產(chǎn)的Venor GeM Sample Preparation Kit可從細(xì)胞上清和生物制品中分離支原體DNA,全程只需30分鐘。分四步組成:細(xì)胞溶解,DNA特異性與層析柱結(jié)合,祛除殘留的污染物和抑制劑,洗脫DNA。該試劑盒符合歐洲藥典規(guī)范。
綜上所述,您是不是已經(jīng)對(duì)Minerva公司的支原體DNA提取試劑盒,有所了解。如果還有其他疑問,請(qǐng)咨詢締一生物/締一生物資深專家。